Das Stundenbuch des Alfonso d’Este entstand zwischen 1505 und 1510 am Hof des Herzogs von Ferrara und gilt als das letzte große Meisterwerk der italienischen Buchmalerei der Renaissance. Es wurde von dem Miniaturisten Matteo da Milano geschaffen, einem der bedeutendsten Buchkünstler seiner Zeit.

Das Werk umfasst 199 Blätter, darunter einen prachtvoll illuminierten Kalender und 29 ganzseitige Miniaturen von außergewöhnlicher malerischer Qualität. Die Seiten sind von goldenen Initialen, feinen Bordüren und kostbaren Ornamenten umgeben. Matteo da Milano verband klassische Formen mit flämischen und nordeuropäischen Einflüssen und schuf so eine neue, elegante Ausdrucksweise der Buchkunst.

Das Stundenbuch gehörte zur herzoglichen Bibliothek der Este und bildet mit der Bibel des Borso d’Este und dem Breviarium des Ercole d’Este die berühmte Trilogie der Ferrarer Buchmalerei. Heute wird der Hauptteil der Handschrift im Calouste Gulbenkian Museum in Lissabon aufbewahrt.